2.4 耐药的稳定性测定

    用无药RPMI 1640培养基培养HL-60/HT子代细胞两个月，并检测对HT的IC50值，具体方法参照2.3，确定HL-60/HT细胞耐药稳定性。

    2.5 流式细胞术测定P27Kip1、P170的表达

    设HL-60和HL-60/HT细胞组，又各分正常人单个核细胞组、药物(Ara-c、VPA单独或联合)作用前和作用后。将重悬细胞的密度调整为l×l06/mL，取100μL破膜液A加入到50μL细胞悬液中，并放置于避光的温室内，用2mL PBS缓冲液以1000×g转速离心5min洗涤，弃上清，于细胞悬液中加入破膜液B 100μL和5μL抗P27Kip1也可以是P170抗体，PBS缓冲液洗涤。加入FITC标记二抗5μL，静置15min后离心洗涤。取1%浓度的多聚甲醛450μL，固定30min，然后用流式细胞仪进行检测。将P27Kip1或P170抗体换成PBS即可进行空白对照。

    2.6 统计学分析

    所有数据均用SPSS12.0统计软件处理 ......