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编号:13123923
冰冻亚型红细胞融化洗涤后保存条件及使用效期的优化选择(2)
http://www.100md.com 2014年9月1日 邱玉霞 韩惠云 张国平等
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    参见附件。

     [Key words] Frozen subgroup red blood cell; Melting and washing; Preservation; Quality

    甘油作为最常用的细胞内低温保护剂,已广泛应用于红细胞的低温保存。利用该方法保存红细胞,可使红细胞寿命长达10年,甚至延长到21年[1]。我站利用该原理对日常工作中遇到的ABO亚型标本进行冰冻保存,并作为弱阳性参考品对多家单克隆抗血清试剂进行质量评价,从中挑选对亚型检出率高的试剂用于献血者血型鉴定的初、复检,在一定程度上提高了献血者的ABO亚型检出率[2-3]。为进一步将ABO亚型红细胞作为弱阳性质控品,有效应用于献血者ABO血型鉴定的室内质控及医院供血库ABO血型鉴定的质量测评等工作中,本研究对冰冻亚型红细胞融化洗涤后的保存条件及使用效期进行优化选择,报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    9%Nacl注射液(北京博得桑特输血器材公司);0.9%Nacl注射液、抗-A、抗-B(上海血液生物医药有限责任公司);1.6%Nacl溶液(由9%和0.9%Nacl注射液按比例配制);血浆游离血红蛋白测定试剂盒(北京瑞尔达生物科技有限公司);硫酸庆大霉素(开封制药集团有限公司);MDF-192型-80℃低温冰箱(大连三洋冷链公司);HH.W21.600型电热恒温水浴箱(北京光明医疗仪器厂);LD5-2A型台式离心机(北京雷勃尔公司)。

    1.2 红细胞分组和保存

    从本站建立的冰冻亚型红细胞信息库[4]中,选择10份储存量较大、弱抗原与抗血清的反应强度为2+~3+的标本,融化洗涤后将压积红细胞各一分为二,分别以AB型血浆和MAP红细胞保存液按1.5倍的比例悬浮,加入终浓度为0.05mg/mL的硫酸庆大霉素混匀后,再各等分为1、2、3、4四组,第1组始终放置2~6℃冰箱保存,第2、3、4组每天在室温分别放置0.5、1和2h后,再放入2~6℃冰箱保存,于保存0、10、20、30、40、50、60d时,分别检测四组红细胞相关质量指标。

    1.3 红细胞质量指标检测

    用邻甲联苯胺法检测红细胞上清中FHb含量;用盐水试管法[5]检测红细胞A、B抗原。以红细胞每天置室温1h再恢复2~6℃储存的模式下,FHb浓度达1.0g/L,同时红细胞血型抗原减弱达1+的最小储存天数再减10d作为其使用效期 ......

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