结核分枝杆菌对吡嗪酰胺的药物敏感性试验分析(2)
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1.4.3 菌悬液的制备 刮取初生长2周的培养物或经2次传代后生长2～3周的亚培养物(刮取斜面各个部分的培养物)，置于装有少量0.5%Tween-80生理盐水的试管壁上，用玻璃棒研磨成乳酪状并混于0.5%Tween-80生理盐水内，与麦氏标准比浊管比浊，配成1 mg/mL菌悬液。
1.4.4 接种方法 将1 mg/mL的菌悬液10倍稀释至10～2 mg/mL，以灭菌吸管准确吸取0.1 mL分别接种于含药培养基和对照培养基的斜面上，各管的接种量均为3～10 mg。置37℃孵育，4周观察结果。
1.4.5 质控 每批药敏试验应以结核分枝杆菌参考菌株(H37Rv)检测含药培养基质量。
1.4.6 结果判定标准 根据结核分枝杆菌的菌落特点，在酸性罗氏培养基中形成颗粒状或菜花形的乳酪色的粗糙型菌落，数量大时则是巧克力色判断结核杆菌生长情况。
对照培养基菌落数必须在200以上且无融合。若菌落数低于50时，重新做药物敏感性测定。(-)：培养基斜面上无分枝杆菌菌落生长。(+)：菌落数约占斜面面积的1/4。(2+)：菌落数约占斜面面积的1/2。(3+)：菌落数约占斜面面积的3/4。(4+)：菌落呈菌苔样生长。
菌落数少于20个时，报告菌落数。含药培养基菌落数少于20个时，当作不生长。低浓度含药培养基上生长的菌落数多于20个时，即可判定为耐药。低浓度生长、高浓度不生长为中度耐药；高、低浓度均生长为高度耐药。
1.5 统计学处理
所有数据采用SPSS13.0统计学软件进行处理，计数资料采用x2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 实验组与对照组菌株培养情况
60株培养结核菌株，对照培养基中有1株没有生长，其余59株均生长，结果为4+，长满整个斜面。菌落数均在200以上无融合。浓度50μg/mL的含药培养基中，除了对照中没有生长的1株外，其余59株中有15株生长 ......
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