pIRES-IL-24-PTEN双表达载体的构建及鉴定
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[摘要] 目的 构建携带人IL-24和10号染色体缺失的磷酸脂酶与PTEN双基因的真核表达载体,为研究其表达产物的抑癌机制提供基础。 方法 通过PCR方法获得PTEN、IL-24基因片段,进行T-A克隆,再酶切亚克隆到pIRES载体,酶切、测序鉴定正确后命名为pIRES-IL-24-PTEN载体。脂质体转染A549细胞,提取细胞的总蛋白,Western blot检测IL-24和PTEN蛋白的表达。 结果 酶切、测序显示pIRES-IL-24-PTEN载体序列正确,Western blot检测到IL-24和PTEN蛋白表达。 结论 成功构建pIRES-IL-24-PTEN载体,为后续研究奠定基础。
[关键词] PTEN;IL-24;肿瘤;基因治疗
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