1.2 方法

    1.2.1 半枝莲多糖的制备 取半枝莲粗多糖干燥粉末按照1∶4的比例在45 ℃温水中浸提2 h。加入4倍体积95%乙醇搅拌，室温静置6 h，离心(12000 rpm，15 min)收集沉淀；沉淀经乙醚去脂、氨水脱色、三氯乙酸法脱蛋白，重复实验并以硫酸-苯酚法跟踪检测，保证多糖含量在90%以上。将沉淀用蒸馏水溶解，在液氮中冷冻8 h后取出，用冻干机冷冻48 h，取出冻干粉，将冻干粉溶于适量蒸馏水中，用无菌滤膜过滤器过滤除菌两次，收集滤液并计算浓度，过滤过程采用无菌操作。

    1.2.2 细胞培养 用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基培养SGC-7901胃癌细胞株，在37 ℃、5%CO2环境下的细胞培养箱中进行传代。取呈对数生长的细胞用于实验。

    1.2.3 半枝莲多糖对细胞生长的影响 将对数生长的SGC-7901胃癌细胞用胰酶(EDTA)消化后制备细胞悬液，并将其以每孔细胞浓度为5×103个接种于96孔细胞培养板中，培养24 h使细胞充分贴壁。种板后在已接种的孔内加入不同浓度的半枝莲多糖(SBP)溶液，并使孔中药物质量浓度分别达到20、10、5、2.5 μg/ml，RPMI-1640培养基为阴性对照组 ......