高效液相色谱法测定盐酸环丙沙星乳膏的含量
【摘要】目的建立盐酸环丙沙星乳膏中盐酸环丙沙星的含量测定方法。方法采用HPLC法，色谱柱为HypersilODS2C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流动相为0.05 mol/ml枸橼酸溶液-乙腈(82∶18)，柱温为30 ℃，流速为1.0 ml/min，检测波长为277 nm。结果盐酸环丙沙星在浓度为10.24～61.44 μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9998)，平均回收率为99.96%，RSD=1.26%(n=9)；测得3个批次盐酸环丙沙星乳膏样品中盐酸环丙沙星含量分别为99.40%、99.60%、99.20%，平均99.40%。结论该方法操作简单，重现性好，测定结果可靠，可用于盐酸环丙沙星乳膏中盐酸环丙沙星含量的测定。
【关键词】盐酸环丙沙星乳膏；盐酸环丙沙星；含量测定；HPLC
盐酸环丙沙星属第三代氟喹诺酮类抗菌药物，是体外抗菌活性最强的喹诺酮类药物，临床广泛应用于呼吸、消化、泌尿系统及皮肤软组织等感染性疾病的治疗。本研究特采用HPLC法测定盐酸环丙沙星乳膏中盐酸环丙沙星的含量，为盐酸环丙沙星乳膏的质量控制提供了参考性资料。现将技术资料报道如下。
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1仪器与试剂
1.1仪器Agilent1200型高效液相色谱仪：FA1004B型电子分析天平(北京北科恒信科学器材有限公司)，S20型pH酸度计(梅特勒-托利多公司)。
1.2试剂盐酸环丙沙星对照品(中国药品生物制品检定所，批号130451-200802，供含量测定用)；乙腈为色谱纯，枸橼酸溶液为分析纯，水为重蒸馏水；盐酸环丙沙星乳膏(广东恒健制药有限公司，批号101203、110102、110105)[1]。
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱：HypersilODS2C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：0.05 mol/ml枸橼酸溶液-乙腈(以三乙胺调节pH值至3.5)(82：18)；检测波长：277 nm；流速：1.0 ml/min；进样量：10 μl；柱温：30 ℃；理论板数按盐酸环丙沙星峰计，应不低于2000[2，3]。
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2.2对照品溶液的制备取105 ℃干燥至恒重的盐酸环丙沙星对照品50 mg，精密称定，至100 ml量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，摇匀，得浓度为0.512 mg/ml的盐酸环丙沙星对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备取盐酸环丙沙星乳膏50 mg，精密称定，置100 ml量瓶中，用少量流动相溶解，超声处理30 min，放冷，用流动相定容至刻度，摇匀，滤过，取滤液作为供试品溶液。
2.4线性关系考察精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5、6 ml，分别置于50 ml容量瓶中，分别用流动相稀释并定容至刻度，摇匀，精密吸取10 μl注入高效液相色谱仪，按2.1项下色谱条件测定峰面积，以峰面积(Y)为纵坐标，盐酸环丙沙星对照品浓度(X)为横坐标，进行线性回归[4]。得回归方程为Y=7906.43X+3425.68，r=0.9998，结果表明，盐酸环丙沙星在浓度为10.24～61.44 μg/ml范围内有良好的线性关系。
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2.5稳定性试验取同一份供试品溶液分别在0、2、4、8、12、16、24h，按2.1项下色谱条件进样，测定盐酸环丙沙星的色谱峰面积，结果峰面积的RSD 为1.46%，表明供试品溶液在24h内基本稳定。
2.6精密度试验取对照品溶液，按2.1项下色谱条件进样，重复进样5次，测定盐酸环丙沙星的色谱峰面积，结果峰面积的RSD为1.27%，表明测试仪器的精密度良好。
2.7重复性试验取相同批号供试品6份，按2.3项下方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进样，测定盐酸环丙沙星的色谱峰面积，结果峰面积的RSD 为1.31%，表明该方法的重现性较好。
2.8回收率试验取空白样品9份，分别精密加入盐酸环丙沙星对照品适量(约相当于制剂中盐酸环丙沙星含量的80%、100%、20%)，按2.3项方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进行含量测定，计算回收率，结果平均回收率为99.96%，RSD为1.26%。
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2.9样品含量测定取不同批号的盐酸环丙沙星乳膏样品共3批，按2.3项下方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进样，测定盐酸环丙沙星的色谱峰面积，计算出样品中盐酸环丙沙星含量。测得3批样品中盐酸环丙沙星含量分别为99.40%、99.60%、99.20%，平均为99.40%。
3讨论
本研究参照2010版《中国药典》中盐酸环丙沙星的含量测定方法，通过HPLC法测定盐酸环丙沙星乳膏中盐酸环丙沙星含量，该方法简单、重现性好、测定结果可靠。
本研究结果显示，盐酸环丙沙星乳膏中盐酸环丙沙星的含量平均为99.40%，该方法的精密度试验、稳定性试验、重现性试验及回收率试验结果均较好，可为盐酸环丙沙星乳膏在生产过程中的质量控制提供资料性参考。
参考文献
[1]金燕琴.高效液相色谱法测定盐酸环丙沙星的含量[J].中国实用医药，2011，6(8)：41-42.
[2]冯芳.药物分析[M].北京：化学工业出版社，2003：23-26.
[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京：化学工业出版社，2010：720.
[4]叶茂清，姚少毅，张潮林.HPLC法测定盐酸环丙沙星胃漂浮型缓释片的含量[J].中国药师，2010，13(4)：512-513.
【收稿日期】2011-10-08, 百拇医药(王刚)
【关键词】盐酸环丙沙星乳膏；盐酸环丙沙星；含量测定；HPLC
盐酸环丙沙星属第三代氟喹诺酮类抗菌药物，是体外抗菌活性最强的喹诺酮类药物，临床广泛应用于呼吸、消化、泌尿系统及皮肤软组织等感染性疾病的治疗。本研究特采用HPLC法测定盐酸环丙沙星乳膏中盐酸环丙沙星的含量，为盐酸环丙沙星乳膏的质量控制提供了参考性资料。现将技术资料报道如下。
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1仪器与试剂
1.1仪器Agilent1200型高效液相色谱仪：FA1004B型电子分析天平(北京北科恒信科学器材有限公司)，S20型pH酸度计(梅特勒-托利多公司)。
1.2试剂盐酸环丙沙星对照品(中国药品生物制品检定所，批号130451-200802，供含量测定用)；乙腈为色谱纯，枸橼酸溶液为分析纯，水为重蒸馏水；盐酸环丙沙星乳膏(广东恒健制药有限公司，批号101203、110102、110105)[1]。
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱：HypersilODS2C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：0.05 mol/ml枸橼酸溶液-乙腈(以三乙胺调节pH值至3.5)(82：18)；检测波长：277 nm；流速：1.0 ml/min；进样量：10 μl；柱温：30 ℃；理论板数按盐酸环丙沙星峰计，应不低于2000[2，3]。
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2.2对照品溶液的制备取105 ℃干燥至恒重的盐酸环丙沙星对照品50 mg，精密称定，至100 ml量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，摇匀，得浓度为0.512 mg/ml的盐酸环丙沙星对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备取盐酸环丙沙星乳膏50 mg，精密称定，置100 ml量瓶中，用少量流动相溶解，超声处理30 min，放冷，用流动相定容至刻度，摇匀，滤过，取滤液作为供试品溶液。
2.4线性关系考察精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5、6 ml，分别置于50 ml容量瓶中，分别用流动相稀释并定容至刻度，摇匀，精密吸取10 μl注入高效液相色谱仪，按2.1项下色谱条件测定峰面积，以峰面积(Y)为纵坐标，盐酸环丙沙星对照品浓度(X)为横坐标，进行线性回归[4]。得回归方程为Y=7906.43X+3425.68，r=0.9998，结果表明，盐酸环丙沙星在浓度为10.24～61.44 μg/ml范围内有良好的线性关系。
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2.5稳定性试验取同一份供试品溶液分别在0、2、4、8、12、16、24h，按2.1项下色谱条件进样，测定盐酸环丙沙星的色谱峰面积，结果峰面积的RSD 为1.46%，表明供试品溶液在24h内基本稳定。
2.6精密度试验取对照品溶液，按2.1项下色谱条件进样，重复进样5次，测定盐酸环丙沙星的色谱峰面积，结果峰面积的RSD为1.27%，表明测试仪器的精密度良好。
2.7重复性试验取相同批号供试品6份，按2.3项下方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进样，测定盐酸环丙沙星的色谱峰面积，结果峰面积的RSD 为1.31%，表明该方法的重现性较好。
2.8回收率试验取空白样品9份，分别精密加入盐酸环丙沙星对照品适量(约相当于制剂中盐酸环丙沙星含量的80%、100%、20%)，按2.3项方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进行含量测定，计算回收率，结果平均回收率为99.96%，RSD为1.26%。
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2.9样品含量测定取不同批号的盐酸环丙沙星乳膏样品共3批，按2.3项下方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进样，测定盐酸环丙沙星的色谱峰面积，计算出样品中盐酸环丙沙星含量。测得3批样品中盐酸环丙沙星含量分别为99.40%、99.60%、99.20%，平均为99.40%。
3讨论
本研究参照2010版《中国药典》中盐酸环丙沙星的含量测定方法，通过HPLC法测定盐酸环丙沙星乳膏中盐酸环丙沙星含量，该方法简单、重现性好、测定结果可靠。
本研究结果显示，盐酸环丙沙星乳膏中盐酸环丙沙星的含量平均为99.40%，该方法的精密度试验、稳定性试验、重现性试验及回收率试验结果均较好，可为盐酸环丙沙星乳膏在生产过程中的质量控制提供资料性参考。
参考文献
[1]金燕琴.高效液相色谱法测定盐酸环丙沙星的含量[J].中国实用医药，2011，6(8)：41-42.
[2]冯芳.药物分析[M].北京：化学工业出版社，2003：23-26.
[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京：化学工业出版社，2010：720.
[4]叶茂清，姚少毅，张潮林.HPLC法测定盐酸环丙沙星胃漂浮型缓释片的含量[J].中国药师，2010，13(4)：512-513.
【收稿日期】2011-10-08, 百拇医药(王刚)