蒙药巴特尔-7体外对胃癌细胞生长的影响(1)
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【摘要】目的观察蒙药巴特尔7对体外培养的人胃癌MGC803细胞生长的影响。 方法MGC803细胞经不同浓度蒙药处理后,通过MTT比色法分析蒙药作用后细胞的增殖情况。在倒置光显微镜及荧光显微镜下,观察细胞形态的变化;应用琼脂糖凝胶电泳分析诱导凋亡作用。结果巴特尔7能抑制MGC803细胞的增殖,且抑制作用随药物浓度的增加而增加。光镜下见部分细胞呈现凋亡的形态改变,琼脂糖凝胶电泳未见明显的梯状带。结论巴特尔7对胃癌MGC803细胞生长具有明显的抑制作用。
【关键词】蒙药;胃癌细胞;凋亡
Effect of Inner Mongolia Drugs Bateer7 on growth of human gastric cancer in vitroDENG Xiuling,LIU Shuping,WANG Dong.Department of Biochemistry and Molecular Biology,Inner Mongolia Medical College,Hohhot 010059,China
【Abstract】ObjectiveTo studay the effect of Inner Mongolia Drug Bateer7 on growth of humand gastric cancer MGC803 cell in vitro MethodsBateer7 in different dose were used to treat MGC803 cell, then MTT assay was employed to examine the proliferation inhibitory effect of Mongolia Drug on MGC803 cell.Morphologic changes were observed by reverse discrepancy and offluorescent light staining microscope DNA electophoresis was uitilized to detect the apoptosis of MGC803 cell induced by Bateer7ResultsMTT assay showed that Bateer7 has proliferation inhibiting effect on MGC803 cell in dose dependent manners; morphologic changes of apoptosis was observed by the light microscope DNA electophoresis hasnt observed topical “DNA Ladder”ConclusionBateer7 has growth inhibiting effect on gastric cancer MGC803 cell in vitro.
【Key words】Inner Mongolia Drugs; Gastric cancer cell; apoptosis
作者单位:010059呼和浩特,内蒙古医学院生物化学与分子生物学教研室
(邓秀玲刘淑萍);内蒙古自治区医院神经内科(王栋)恶性肿瘤严重威胁着人们的生命,它的发生、发展与细胞异常增殖和分化有关,如何抑制肿瘤细胞的无限增殖能力,是肿瘤治疗的一个基本问题。本实验探讨蒙药巴特尔7对胃癌细胞生长的影响,为抗肿瘤蒙药的进一步开发提供一些理论依据。
1材料和方法
11实验材料培养基DMEM为Gibco公司产品,胎牛血清为中国医学科学院血液学研究所生产,噻唑蓝(MTT)和二甲基亚砜(DMSO)均为Sigama公司产品。蒙成药巴特尔7(以下简称蒙药)、 由内蒙古中蒙医院制剂室生产,用PBS配成50 mg/ml贮液,02 mm滤膜过滤除菌4℃保存,实验时用培养液稀释到所需浓度。
12细胞培养MGC803细胞由北京肿瘤研究所提供,于含庆大霉素80U/ml、10%灭活胎牛血清的DMEM的培养液中培养,置37℃、5%CO2温箱中孵育,取对数生长期细胞用于实验。
13蒙药对胃癌MGC803的细胞杀伤作用:采用噻唑蓝比色法(MTT法),取对数生长期的MGC803细胞,经消化液消化后制成单细胞悬液,调整细胞浓度为3×104个/ml接种96孔培养板,吹打均匀,每孔接种细胞悬液100 μl,置37℃、5% CO2温箱中孵育。24 h后实验组分别加入不同浓度的蒙药, 终浓度分别为25、125、063、031、015 mg/ml。另设阴性对照组(只有细胞,不加药),空白对照组(只含等量培养基,无细胞和药)。各处理组设8个复孔。以上各处理组总体积均为200 ul。加药后继续培养72 h,每孔加入20 ulMTT(5 mg/ml)37℃温育4 h,离心弃上清后每孔加200 ulDMSO,振荡10 min。选择570 nm波长,酶标仪上检测各复孔吸光度(A值)。进行数据统计时,每组去除一个最大值和最小值,按下列公式计算细胞生长抑制率。
抑制率%=(对照组平均A值实验组平均A值)/(对照组平均A值空白组平均A值)×100% ......
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