ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的对策分析
 |
| 第1页 |
参见附件(1268KB，1页)。
【关键词】全自动加样；拖带假阳性；对策分析
随着全自动加样设备在血液筛查中的广泛应用，其加样过程导致的拖带现象已引起高度关注。笔者在进行血液标本加样检测过程中，发现抗体强阳性标本，引起拖带现象(以抗HIV为例)进行统计分析，现报告如下。
1材料与方法
11血清标本均来自我站街头无偿献血者。
12试剂ELIST试剂为法国伯乐公司生产，在有效期内使用。
13仪器RSP 150&BEP III全自动酶免系统深圳赛勒公司提供。
14方法根据检测项目和试剂说明书的要求，在RSP 150及BEP III控制微机上编制加样程序，加样方向从标本架1起、酶标板从1到12。吸取分配不同的液体试剂或血清标本后，RSP 150按编制程序自动冲洗加样针。
2结果
21第1例抗HIV阳性拖带现象检测出现在抗HIV同一块酶标板的H2、H3、H4……H7位置上，标本检测OD值见表1。本次实验的Cut off值为0134，故6份标本5份阳性1份为“灰区”，根据抗HIV检测规程，6份标本重新双孔复试，结果H2标本检测OD值分别为2759，2543仍为强阳性，H3标本OD值分别为0456，0403为弱阳性，其余4份样本双孔复试为阴性，把H2、H3标本送市疾控中心HIV确认实验室经蛋白印迹法(WB)确认，H2为抗HIV阳性，H3为抗HIV阴性。后追踪相应血袋辩子标本并进行检测，H2样本WB和ELISA结果为阳性，H3样本WB和ELISA均为阴性。
22第2例抗HIV阳性拖带现象检测出现在抗HIV同一块酶标板的E9、E10、E11、E12位置上，标本检测OD值见表2。本次实验的Cut off值为0146，4份标本双孔复试，结果E9标本检测OD值分别为3110，3188仍为强阳性，其他3份样本双孔复试为阴性，把E9标本送市疾控中心HIV确认实验室经蛋白印迹法(WB)确认，仍为抗HIV阳性。
3讨论
目前，许多血站使用全自动加样器及全自动酶免分析系统进行血液检测。全自动加样器由微机控制，可以快速准确的处理大批量标本，并可保证加样的精密度和一致性，大大减少了劳动强度，避免了手工加样的人为误差[1]，提高了血液检测的质量和水平。加完血清或试剂后，加样针根据编好的程序冲洗加样针，不能做到手工加样，一份标本一个加样头，因为我站使用的永久性加样针，因此从理论上讲仪器在加样
作者单位：466000河南省周口市专科病医院检验科
运行方向上从左到右之间拖带污染是不可避免的[2]，同样，同一根加样针，加完强阳性标本，冲洗不干净，接着加下一样本，造成样本污染，结果出现假阳性(第1例拖带阳性为此现象)。正因为如此仪器的生产厂家也考虑到了这个问题，加完一种试剂或标本后机器自动冲洗实践证明，一般情况下能避免左右孔之间的拖带污染，但若遇到高浓度Ag、Ab标本，这种拖带污染是存在的，通过多次实验寻求本实验室全自动加样针的最佳清洗程序，尽可能减少拖带污染。
综上所述实验证明，增加加样针的清洗和擦拭次数(最佳清洗和擦拭程序)，可以减少拖带污染。现在市场有专门针对加样污染使用的清洗剂，据报道可以使加样针污染降低。一次性加样针减少了洗涤环节，在保持血液加样的高精确度和自动化的前提下，又可以完全避免由于拖带污染带来的影响[3]。建议血站在血液检测中尽可能使用一次性加样针。但如果出现了这种拖带污染造成的现象时，在对可疑拖带污染阳性标本进行双孔复试和确认时，应使用相应的血袋标本并查看献血者原始资料，并随访原献血者加以证实 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(1268KB，1页)。