运动后大鼠与正常大鼠纹状体5-羟色胺阳性细胞的比较研究
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【摘要】 目的 观察负荷运动后大鼠5-羟色胺阳性反应物的变化。方法 用组织化学和图象分析方法观察大鼠纹状体神经原内5-羟色胺阳性细胞的变化。结果 负荷运动后大鼠纹状体神经原5-羟色胺细胞免疫反应增强(P<0.01)。结论 5-羟色胺阳性反应物增加这可能与大运动量后躯体运动协调性发生变化有关。
【关键词】 运动；5-羟色胺；纹状体；大鼠
Effect of athletics on 5-HT in the corpus striatum of rats
LI Ke.
Hygienic professional techndogy institution of Liaoning Shenyang 110101,China
【Abstract】 Objective To investigate the relationship between changes of 5-HT and athletics.Methods The morphine dependent model of male rats was athleticed.The alteration of 5-HT and ultrastructure of anterior horn neurous were studied by means of histochemistry and quantitative method of micro-image analysis system were observed morphine dependence rats.Results The average grey value of5-HT positive reactive product in experimental group was grower than that in control group(P<0.01).Conclusion 5-HT may play an important role in maintenance and development of morphine dependence.
【Key words】 Athletics；5-HT ；Corpus striatum; Rat
5-羟色胺(5-Hydroxyptamine,5-HT)是一种吲哚衍生物,广泛存在于哺乳动物组织内。
5-羟色胺递质系统也比较集中，其神经元主要位于低位脑干近中线区的中缝核内。按其纤维投射途径的不同，也可分为三部分：上行部分、下行部分和支配低位脑干部分。上行部分的神经元位于中缝核上部，其神经纤维投射到纹状体、丘脑、下丘脑、边缘前脑和大脑皮层。脑内5-羟色胺主要来自中缝核上部，破坏中缝核上部可使脑内5-羟色胺含量明显降低。
纹状体(corpus striatum)是由尾状核和豆状核组成,是锥体外系的重要组成部分,在调节躯体运动中起重要作用,近年来研究发现,苍白球作为基底前脑的一部分参与机体的学习记忆功能。我们观察运动负荷后大鼠纹状体内神经元5-羟色胺阳性反应物改变，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 实验材料 雄性Wistar大鼠 中国医科大学动物室提供,5-HT 试剂盒(购于Sigma公司)； LUZEX-F显微图像分析仪(日本，松下公司)。
1.2 实验动物分组
本实验选用雄性健康Wistar大鼠40只，体质量260~300 g，随机分成二组。正常对照组：20只。实验组：20只。
1.3 实验方法
1.3.1 负荷运动大鼠模型制备 每天进行2次游泳运动负荷，45 min/次，共60 d。
1.3.2 组化标本制备 对实验动物用1%戊巴比妥钠(40 ml/kg)腹腔麻醉后开胸，经左心室70滴/min滴入1%肝素钠的生理盐水500 ml，同时剪开右心耳。继用0.1 M磷酸盐缓冲液(PBS,pH=7.4)配制的固定液(含4%多聚甲醛)灌流固定。取出实验动物的脊髓组织，放入含4%多聚甲醛PBS的固定液中进行后固定大约2 h，之后将实验动物的脊髓组织切成薄片移入含20%蔗糖的PBS中。在4℃冰箱中存放，至组织薄片沉底，经水包埋，恒冷箱连续横切片，片厚20 μm。经OCT包埋，恒冷箱连续切片，片厚16 m，-70℃保存备用。
1.3.3 尼氏染色
冰冻切片吹干，经PBS漂洗5 min×3次，将切片置入1%甲苯胺蓝溶液中37℃孵育90 min，取出后用蒸馏水冲洗，PBS漂洗5 min×3次，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，光镜下观察。
1.3.4 5-HT染色方法 ①冰冻切片吹干，PBS冲洗5 min×3次;
②1:50正常羊血清中孵育30 min；③倾去血清，加入兔抗5-HT抗体(1:4000)，4℃过夜；④PBS冲洗5 min×3次；⑤滴加生物素化抗兔抗体(二抗)1:40稀释，室温孵育60 min；⑥PBS冲洗5 min×3次;⑦滴加HRP标记的卵白素1:40稀释，室温孵育60 min;⑧PBS冲洗5 min×3次;⑨DAB成色5 min;⑩)PBS冲洗5 min×3次;B11梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，光镜下观察;B12对照实验在邻近切片上进行，用抗原吸收后的一抗代替一抗，结果为阴性。
1.4 显微图像定量分析 用Luzex-F显微图像分析仪测定纹状体单位面积5-HT阳性反应物平均灰度值，所得数据经计算机SAS软件系统进行统计学处理，用(x±s)表示。
2 结果
2.1 尼氏染色结果 正常对照组大鼠纹状体神经原细胞的尼氏染色切片上 ......
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