1 材料与方法

    1.1 材料 质粒pH2由复旦大学生命科学院黄教授赠予，婴儿双歧杆菌2001株由四川大学华西口腔医学院赠予，引物合成和基因测序由Invitrogen Co.(上海)完成，质粒纯化试剂盒和PCR产物纯化试剂盒购自Omega Co.，PCR反应试剂盒和DNA Marker购自Promega Co.(USA)，BamH I,Sal I购自Takara Co.,200 bp DNA ladder marker 购自Qiagen Co.(北京),BHI(brain-heart infusion)培养基购自Oxoid Co.其他试剂均为国产分析纯。

    1.2 方法 扩增CD基因和UPRT基因 分别接种携带有质粒pGEX/CD和pGEX/UPRT的大肠杆菌(E.coli)到5 ml LB液体培养基中37℃震摇过夜，纯化质粒pGEX/CD和pGEX/UPRT作为PCR反应的模板。根据CD基因在Genebank(NC-0009131)中的序列设计引物，上游引物为：5’-CCGGGATCCCTAACAATGTCGAATAAC-3’，下游引物为：5’-GTGGTCGACGAATTCTGTAACCCAGTC-3’ ......