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编号:13800374
欧当归内酯A对实验性纤维化肝脏NO及内皮细胞功能的影响(3)
http://www.100md.com 2020年10月1日 《世界中医药》 202019
     1.2.6 荧光探针法 细胞接种于96孔板,长至亚单层,弃原培养液,换为各药物成分培养液,100 μL/孔,4个复孔,孵育24 h。弃药物培养液,原位装载NO探针,100 μL/孔。37 ℃细胞培养箱内孵育20~40 min。PBS洗3次。使用495 nm激发波长,515 nm发射波长,Thermo scientific varioskan flash光谱扫描多功能读数仪上检测。

    1.2.7 Griess法 收集细胞培养液上清,96孔板每空加50 μL,在各孔中加入50 μL室温Griess Reagent I,然后各孔中加入50 μL Griess Reagent II,酶标仪540 nm波长测定吸光度。

    1.3 统计学方法 采用SPSS 12.0统计软件包进行统计学分析。计量资料均数±标准差用(±s)表示。组间比较使用单因素方差分析。纤维化等级资料采用Ridit分析,免疫组化半定量分析采用image-pro plus 6.1图像分析软件 ......
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