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编号:13612319
附子品种的抗病性及根表真菌多样性研究(2)
http://www.100md.com 2017年6月1日 《世界中医药》 201711
     1 材料与方法

    1.1 样品采集

    1.1.1 附子植株样品采集 本研究所涉附子主要栽培品种有南瓜叶、大花叶、小花叶,于2016年06月中旬采集于四川省江油市河西乡普照村GAP基地(N31°44′′,E104°42′)。按照叶形,对附子品种分别进行拍照,根系带土采挖,并编号。

    1.1.2 根表土样品采集 附子植株样品采挖后,小心刮取每株附子根系的根表土约100 g,多个实验重复附子植株的土壤样品混合后烘干,通过四号筛过滤掉木屑、石块等杂质,取约10 g样品用于总DNA提取和高通量测序。采集样品包括正常附子根表土壤(编号T1、T2、T3、T4、T5,统称G1)、大花叶型附子根表土壤(编号D1、D2、D3、D4,统称G2)、患病大花叶型附子根表土壤(编号DV1、DV2、DV4,统称G3)、小花叶型附子根表土壤(编号X1、X2、X3、X4、X5,统称G4)。

    1.2 土壤DNA提取与PCR扩增 采用SDS-CTAB法[7]提取土壤样品总DNA,利用1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度和浓度 ......
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