齐墩果酸通过TGR5调节肥胖小鼠体内糖脂代谢的实验研究(2)
1.2 小鼠腹腔白色脂肪的分离
处死小鼠后，仔细分离出小鼠腹腔内的全部白色脂肪，并称重，以此代表小鼠体内脂肪重量。
1.3 组织学观察
肝组织以10%福尔马林固定，而后脱水、浸蜡、切片，常规苏木精-伊红染色然后进行标准组织学学观察。
1.4 代谢评估
小鼠过夜禁食16h后腹腔注射D-葡萄糖(2g/kg体重)进行GTT实验。分别于注射前、注射后15min、30min、60min、90min及120min采集小鼠尾静脉血液，通过便携式血糖仪检测血糖浓度。
1.5 RT-PCR
根据产品说明书用TRI试剂提取总RNAs。通过SuperScript第一链合成系统用2?g合成cDNA，以cDNA为模板，加入特异性引物和2Xsyb Green，通过Applied Biosystem 7300 RT-PCR系统对mRNA进行扩增。按照两步法标准PCR 扩增程序进行反应：95℃ 30s 预变性，95℃ 5s～60℃ 34s并循环40 次，95℃ 15s，60℃ 1 min，95℃ 15s ......
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处死小鼠后，仔细分离出小鼠腹腔内的全部白色脂肪，并称重，以此代表小鼠体内脂肪重量。
1.3 组织学观察
肝组织以10%福尔马林固定，而后脱水、浸蜡、切片，常规苏木精-伊红染色然后进行标准组织学学观察。
1.4 代谢评估
小鼠过夜禁食16h后腹腔注射D-葡萄糖(2g/kg体重)进行GTT实验。分别于注射前、注射后15min、30min、60min、90min及120min采集小鼠尾静脉血液，通过便携式血糖仪检测血糖浓度。
1.5 RT-PCR
根据产品说明书用TRI试剂提取总RNAs。通过SuperScript第一链合成系统用2?g合成cDNA，以cDNA为模板，加入特异性引物和2Xsyb Green，通过Applied Biosystem 7300 RT-PCR系统对mRNA进行扩增。按照两步法标准PCR 扩增程序进行反应：95℃ 30s 预变性，95℃ 5s～60℃ 34s并循环40 次，95℃ 15s，60℃ 1 min，95℃ 15s ......
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