胎猪脱细胞主动脉作为小口径组织工程血管替代物的体内试验研究(1)
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[摘要]目的：研究胎猪脱细胞主动脉(decellularized aorta of fetal pigs，DAFP)的生物相容性，确定其是否有作为支架材料用于小口径组织工程血管移植的潜力。方法：利用胰酶和核酸酶联合的脱细胞方法来制备胎猪主动脉脱细胞基质(DAFP)，将其作为小口径组织工程血管的生物支架材料移植在成年犬单侧颈总动脉处，并监测其移植处的血流通畅情况，后期又通过组织学染色观察组织工程血管的组织学结构；扫描电镜观察血管的内表面结构；透射电镜观察其内表面的内皮细胞再生情况。结果：组织学染色结果表明构建的小口径组织工程血管具有完整的内膜层及中膜层结构；扫描电镜结果显示组织工程血管内表面覆盖着完整的内皮细胞层。结论：DAFP有作为小直径组织工程血管支架用于体内移植的潜力。
[关键词]组织工程；血管移植；生物支架材料；细胞外基质
[中图分类号]R318 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455(2012)05-0773-03
The vivo study on decellularized aorta of fetal figs can be substituted for tissue engineered small-diameter blood vessel
ZHANG Ying-bo,LIU Guo-feng,LI Qing-chun,YANG Da-ping
(Department of Plastic Surgery,The Second Affiliated Hospital of Harbin Medical University,Harbin 150086,Heilongjiang,China)
Abstract: Objective To study the biocompatibility of the DAFP,determining it weather have a potential as a scaffold of tissue engineered small-diameter blood vessel graft. Methods Carotid artery of fetal pig was removed cells by using Trypsin/EDTA,ribonuclease and desoxyribonuclease.Afterward， we transplanted the DAFP into unilateral carotid artery of 6 adult dogs individually.Both the DAFP and the tissue which have been transplanted were evaluated with Hematoxylin and Eosin (H&E) staining,scanning electron microscopy and transmission electron microscopy. Results H＆E staining and electron microscopy confirmed that carotid arteries have intact monolayer endothelial cells. Conclusion Decellularized aorta of fetal figs have the ability to substitute for further small-diameter vascular tissue engineering.
Key words:tissue engineering， vascular graft， biological scaffold， extracellular matrix
动脉粥样硬化及周围血管疾病是世界范围内危害人类健康的主要疾病， 并且发病率逐年上升[1]，病情严重的患者常需要通过小口径血管(内径<6mm)移植的手段进行外科手术治疗。自体静脉或者动脉(如：大隐静脉、内乳动脉等)是最好的替代物，但是约有30%的患者因缺少合适的自体血管，而必须采用组织工程血管来替代移植。在血管组织工程研究中，支架材料是组织工程构建血管的基本要素之一，包括高分子可生物降解聚合物材料和脱细胞生物材料[2]，在生物相容性和适宜的生物力学性质方面脱细胞生物材料明显优于高分子可生物降解聚合物材料，生物材料中经过脱细胞处理的异体血管基质很好地去除了抗原性， 移植后与受体细胞有较好的相容性[3-4]，因此也更适合用于小口径血管的高张力、低血流的特殊状态[5]，从而达到减少术后急性血栓、新内膜增生、动脉瘤形成、感染等病变发生的目的，有效地增加了移植血管的通畅率。本实验利用胰酶和核酸酶联合的脱细胞方法制备DAFP，将其作为小口径组织工程血管的生物支架材料，并在以往的实验中充分的验证这一组织工程血管支架材料的组织学特性及生物力学性质[6]。为了逐步向临床过渡提供可靠的依据，笔者进一步进行了动物模型的体内实验观察，将该脱细胞组织工程血管支架材料移植在成年犬单侧颈总动脉处并监测其存活状况，在确定组织工程血管内血流通畅；周围血肿基本吸收后，二次手术取出移入的组织工程血管，并进行组织学监测和电镜观察 ......
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