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编号:13084190
大黄酸PEGPCLPEI纳米粒的制备及体外评价(4)
http://www.100md.com 2017年10月8日 《中国中药杂志》 2017年第16期
     27细胞摄取效率考察

    将对数生长期的HK2细胞用DMEM培养基稀释至密度为1×105个/mL的细胞悬液,取12孔板,每孔加入1 mL细胞悬液,稳定培养12 h。于一定的时间点加入100 μL等量荧光强度的PPPCy5RHNPS或PPCy5RHNPS,使其孵育0,025,05,1,15,2,3 h,吸弃培养基,PBS冲洗3遍,胰酶消化,收集细胞,采用流式细胞仪测定HK2细胞在不同孵育时间摄取各纳米制剂的平均荧光强度,绘制摄取速率曲线,评价HK2对各纳米制剂的摄取效率。

    28细胞摄取机制考察

    将对数生长期的HK2细胞用DMEM培养基稀释至密度为1×105个/mL的细胞悬液,取规格为35 mm的玻底培养皿,每皿加入1 mL细胞悬液,稳定培养24 h。采用激光共聚焦显微镜观察PPPCy5RHNPS和PPCy5RHNPS的细胞摄取过程及胞内分布:首先按照Hoechst 33342试剂盒和LysoTracker Green DND99试剂盒操作指南,每皿加入02 μL LysoTracker Green DND99标准液,20 min后每皿滴加2滴Hoechst 33342标准液 ......
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