HPLC测定新疆紫草不同部位中8种羟基萘醌的含量(1)
[摘要] 建立同时测定新疆紫草Arnebia euchroma不同部位中左旋紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β， β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和异戊酰紫草素等8种羟基萘醌含量的高效液相色谱法。采用Waters Xbridge C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流动相乙腈-0.05%甲酸水溶液(70∶30)，检测波长275 nm，流速1 mL·min-1，柱温30 ℃。定量结果显示，新疆紫草各部位中主要成分含量差异较大，根皮含量最高，其次是根，再次是茎残基，根木质部和地上部分含量较低。本研究为确定紫草药用部位提供科学依据。
[关键词] 新疆紫草；高效液相色谱；不同部位；含量测定；羟基萘醌；β-羟基异戊酰紫草素；β， β′-二甲基丙烯酰阿卡宁；异戊酰紫草素
[Abstract] This present study is to develop an HPLC method for simultaneous determination of eight hydroxyl naphthoquinones， shikonin， β-hydroxy-isovalerylshikonin， acetylshikonin， β-acetoxy-isovalerylshikonin， deoxyshikonin， isobutyrylshikonin， β，β′-dimethylacrylshikonin and isovalerylshikonin. The eight constituents were measured on a Waters Xbridge C18 column (4.6 mm×250 mm，5 μm) with isocratic elution of acetonitrile-0.05% formic acid solution (70∶30) at a flow rate of 1.0 mL·min-1. The detection wavelength was 275 nm and the column temperature was 30 ℃. The results of content determination indicated that significant differences of the eight compounds exist in every part of Arnebia euchroma，in which the highest part was the root bark， followed with the root， then the stem residues. The content of the xylem of root and aerial part was lower than the above parts. The results provided scientific basis for the medicinal parts of A. euchroma.
, 百拇医药
[Key words] Arnebia euchroma；HPLC；different parts；content determination；hydroxyl naphthoquinones；β-hydroxy-isovalerylshikonin；β， β′-dimethylacrylshikonin；isovalerylshikonin
紫草为常用药材，最早见于《神农本草经》，历代本草均有收载。新疆紫草是1990年到2015年版《中国药典》[1-6]中收录的紫草药材之一，来源于软紫草属的新疆紫草Arnebia euchroma (Royle) Johnst的干燥根，具有清热凉血，活血解毒，透疹消斑，用于血热毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、疮疡、湿疹、水火烫伤。
市场上销售的新疆紫草不同批次的药材性状差别较大，2015年版《中国药典》一部规定新疆紫草表面紫红色或紫褐色，皮部疏松，常10余层重叠，易剥落，顶端常有较大的茎残基，木部较小，黄白色或黄色。市售新疆紫草药材有的批次仅有根皮，有的批次带有较大茎残基部分，甚至带有绿色的茎叶等地上部分；根的木部大小不一，小的圆形直径1～3 mm，大的半月形或圆柱形，直径超过1 cm。
, 百拇医药
紫草中化学成分报道较多，主要活性成分为紫草素及其衍生物等羟基萘醌等紫色成分[7]。关于紫草药材的含量测定报道已有多篇[8-10]，主要集中在紫草根的含量测定，最多同时测定7种主要成分。周健等[11]采用HPLC测定了新疆紫草的根和茎残基中的β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和紫草素的含量，根中含量高于茎残基2倍以上。但未见有采用高效液相色谱法同时测定地上部分以及根木质部中化学成分的文献报道。紫草各部位差别较大，根的木部以及地上非紫色部分中含羟基萘醌类成分较低。不同部位在药材中的比例将直接影响药材的质量，有必要对紫草各部位有效成分的含量进行系统研究。本实验选择左旋紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和异戊酰紫草素等8种羟基萘醌类成分为指标，建立HPLC法对新疆紫草药材以及根皮、木部、茎残基以及地上部分(主要是茎叶等非紫色部分)进行了含量测定。本研究通过比较紫草不同部位8种活性成分含量，可进一步控制市售药材紫草的质量，并为确定紫草药用部位提供科学依据。
1 材料
1.1 仪器
安捷倫1260型高效液相色谱仪(配二极管阵列检测器、四元泵、自动进样器)，QUINTIX313-1CN型1/1万电子天平(Sartorius公司)，MSE125S型1/10万电子天平(Sartorius公司)，纯水仪(Millipore公司)，超声波清洗器(KQ-300G型，昆山市超声仪器有限公司)。, http://www.100md.com(昝珂 郑凰雅 刘杰 过立农 郑健 马双成)
[关键词] 新疆紫草；高效液相色谱；不同部位；含量测定；羟基萘醌；β-羟基异戊酰紫草素；β， β′-二甲基丙烯酰阿卡宁；异戊酰紫草素
[Abstract] This present study is to develop an HPLC method for simultaneous determination of eight hydroxyl naphthoquinones， shikonin， β-hydroxy-isovalerylshikonin， acetylshikonin， β-acetoxy-isovalerylshikonin， deoxyshikonin， isobutyrylshikonin， β，β′-dimethylacrylshikonin and isovalerylshikonin. The eight constituents were measured on a Waters Xbridge C18 column (4.6 mm×250 mm，5 μm) with isocratic elution of acetonitrile-0.05% formic acid solution (70∶30) at a flow rate of 1.0 mL·min-1. The detection wavelength was 275 nm and the column temperature was 30 ℃. The results of content determination indicated that significant differences of the eight compounds exist in every part of Arnebia euchroma，in which the highest part was the root bark， followed with the root， then the stem residues. The content of the xylem of root and aerial part was lower than the above parts. The results provided scientific basis for the medicinal parts of A. euchroma.
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[Key words] Arnebia euchroma；HPLC；different parts；content determination；hydroxyl naphthoquinones；β-hydroxy-isovalerylshikonin；β， β′-dimethylacrylshikonin；isovalerylshikonin
紫草为常用药材，最早见于《神农本草经》，历代本草均有收载。新疆紫草是1990年到2015年版《中国药典》[1-6]中收录的紫草药材之一，来源于软紫草属的新疆紫草Arnebia euchroma (Royle) Johnst的干燥根，具有清热凉血，活血解毒，透疹消斑，用于血热毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、疮疡、湿疹、水火烫伤。
市场上销售的新疆紫草不同批次的药材性状差别较大，2015年版《中国药典》一部规定新疆紫草表面紫红色或紫褐色，皮部疏松，常10余层重叠，易剥落，顶端常有较大的茎残基，木部较小，黄白色或黄色。市售新疆紫草药材有的批次仅有根皮，有的批次带有较大茎残基部分，甚至带有绿色的茎叶等地上部分；根的木部大小不一，小的圆形直径1～3 mm，大的半月形或圆柱形，直径超过1 cm。
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紫草中化学成分报道较多，主要活性成分为紫草素及其衍生物等羟基萘醌等紫色成分[7]。关于紫草药材的含量测定报道已有多篇[8-10]，主要集中在紫草根的含量测定，最多同时测定7种主要成分。周健等[11]采用HPLC测定了新疆紫草的根和茎残基中的β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和紫草素的含量，根中含量高于茎残基2倍以上。但未见有采用高效液相色谱法同时测定地上部分以及根木质部中化学成分的文献报道。紫草各部位差别较大，根的木部以及地上非紫色部分中含羟基萘醌类成分较低。不同部位在药材中的比例将直接影响药材的质量，有必要对紫草各部位有效成分的含量进行系统研究。本实验选择左旋紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和异戊酰紫草素等8种羟基萘醌类成分为指标，建立HPLC法对新疆紫草药材以及根皮、木部、茎残基以及地上部分(主要是茎叶等非紫色部分)进行了含量测定。本研究通过比较紫草不同部位8种活性成分含量，可进一步控制市售药材紫草的质量，并为确定紫草药用部位提供科学依据。
1 材料
1.1 仪器
安捷倫1260型高效液相色谱仪(配二极管阵列检测器、四元泵、自动进样器)，QUINTIX313-1CN型1/1万电子天平(Sartorius公司)，MSE125S型1/10万电子天平(Sartorius公司)，纯水仪(Millipore公司)，超声波清洗器(KQ-300G型，昆山市超声仪器有限公司)。, http://www.100md.com(昝珂 郑凰雅 刘杰 过立农 郑健 马双成)