红花生育酚环化酶基因的克隆及表达分析(2)
本研究以红花种子为材料，利用课题组前期转录组测序文库中高表达的Uingene700为基础[6]，利用RT-PCR技术克隆红花CtTC基因的cDNA序列，并对其序列进行生物信息学分析及表达分析，为人们深入了解TC基因在植物Vit E代谢途径的表达调控研究奠定基础。
1 材料
1.1 样品 红花C. tinctorius样品采自吉林农业大学种植基地，由吉林农业大学胡全德教授进行物种鉴定。取开花后5，15，30，50 d的新鲜种子用于表达分析，用开花后50 d种子(成熟种子)用于TC基因克隆。剪取花苞，取新鲜种子，迅速放于液氮中，锡箔纸包好后于-80 ℃保存备用。15% PEG 8000模拟干旱条件，对四叶期红花进行干旱胁迫，分别取胁迫0，2，4，6，8，10 d后的叶片，迅速放于液氮中，锡箔纸包好后于-80 ℃保存备用。
1.2 仪器与试剂 限制性内切酶、RNAiso Plus试剂、LA Taq 酶、高纯质粒小量制备试剂盒、 DNA 连接试剂盒、 DNA 纯化回收试剂盒、反转录试剂盒、 SYBR@Premix Ex TaqTM Ⅱ (Tli RNaseH Plus)均购自宝生物工程(大连)有限公司 ......
您现在查看是摘要页，全文长 3700 字符。
1 材料
1.1 样品 红花C. tinctorius样品采自吉林农业大学种植基地，由吉林农业大学胡全德教授进行物种鉴定。取开花后5，15，30，50 d的新鲜种子用于表达分析，用开花后50 d种子(成熟种子)用于TC基因克隆。剪取花苞，取新鲜种子，迅速放于液氮中，锡箔纸包好后于-80 ℃保存备用。15% PEG 8000模拟干旱条件，对四叶期红花进行干旱胁迫，分别取胁迫0，2，4，6，8，10 d后的叶片，迅速放于液氮中，锡箔纸包好后于-80 ℃保存备用。
1.2 仪器与试剂 限制性内切酶、RNAiso Plus试剂、LA Taq 酶、高纯质粒小量制备试剂盒、 DNA 连接试剂盒、 DNA 纯化回收试剂盒、反转录试剂盒、 SYBR@Premix Ex TaqTM Ⅱ (Tli RNaseH Plus)均购自宝生物工程(大连)有限公司 ......
您现在查看是摘要页，全文长 3700 字符。