樟树4二磷酸胞苷2C甲基D赤藓醇激酶基因的克隆及表达分析(3)
24不同化学型樟树中CMK1基因表达量的分析
采用华越洋核酸提取试剂盒，按照说明书提取不同化学型樟树叶片的RNA，采用RTPCR方法获得不同化学型樟的cDNA。采用DNAMAN设计RealTime PCR引物，CMK1realtimeL：5′GAAGTCTTACCGTCTCTGAAACG3′；CMK1realtimeR：5′CACTGGTTCTCTTCCCGAGTGAG3′； actinrealtimeL：5′CCAGCCTTCACTCATTGGAATGG3′； actinrealtimeR：5′CTGTACTTCCTTTCTGGTGGTGC3′。进行RealTime PCR检测不同化学型樟中CMK1基因的表达量，所用仪器为ABI公司TF 7500型Real Time PCR System，反应体系为：cDNA 1 μL，SYBR Premix Ex Taq 5 μL，PrimerL 02 μL，PrimerR 02 μL，ROX(Ⅱ)02 μL ，ddH2O 34 μL ，PCR 反应条件为： 95 ℃ 30 s，95 ℃ 5 s ......
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采用华越洋核酸提取试剂盒，按照说明书提取不同化学型樟树叶片的RNA，采用RTPCR方法获得不同化学型樟的cDNA。采用DNAMAN设计RealTime PCR引物，CMK1realtimeL：5′GAAGTCTTACCGTCTCTGAAACG3′；CMK1realtimeR：5′CACTGGTTCTCTTCCCGAGTGAG3′； actinrealtimeL：5′CCAGCCTTCACTCATTGGAATGG3′； actinrealtimeR：5′CTGTACTTCCTTTCTGGTGGTGC3′。进行RealTime PCR检测不同化学型樟中CMK1基因的表达量，所用仪器为ABI公司TF 7500型Real Time PCR System，反应体系为：cDNA 1 μL，SYBR Premix Ex Taq 5 μL，PrimerL 02 μL，PrimerR 02 μL，ROX(Ⅱ)02 μL ，ddH2O 34 μL ，PCR 反应条件为： 95 ℃ 30 s，95 ℃ 5 s ......
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