丹参水提液对萝卜种子种苗化感效应谱效关系研究(1)
[摘要] 为了确定丹参水浸液指纹图谱所代表的特征峰与其对萝卜种子种苗化感效应的的相关性，该文采用灰关联度分析构建了丹参水浸液对萝卜种子种苗化感效应与水浸液指纹图谱的“谱效关系”。分析发现丹参水浸液15个共有峰对萝卜种子种苗化感作用贡献率较高。这一研究模式为中药化感成分筛选研究提供了新的思路。
[关键词] 丹参;水提液;指纹图谱;化感效应;谱效相关
Chromatography-efficacy relation study between HPLC fingerprints and
allelopathic effect of Salvia miltiorrhiza aqueous solution on radish
NIU Min， LIU Hong-yan， LI Jia， ZHANG Yong-qing
, 百拇医药
(Shandong University of Traditional Chinese Medicine， Ji′nan 250355， China)
[Abstract] To explore the effective components represented by fingerprint contributed to allelopathic effect of different Salvia miltiorrhiza aqueous concentration on seeds and seedlings of radish， grey relational analysis was used to establish the chromatography-efficacy relation. The results show that 15 peaks devote high allelopathic contribution to radish seeds and seedlings. The study will provide a new concept for allelochemicals screening and study.
, 百拇医药
[Key words] Salvia miltiorrhiza; aqueous extracts; HPLC; allelopathic; chromatography-efficacy relation
doi：10.4268/cjcmm20150519
[收稿日期] 2014-09-13
[基金项目] 山东省科技发展计划项目(2008GG2NS02022);山东中医药大学大学生研究训练计划(SRT)项目(201310441027)
[通信作者] 张永清，教授，主要从事中药资源及其质量控制研究，E-mail：zyq622003@126.com
[作者简介] 牛敏，硕士研究生，E-mail：962895949@qq.com
, http://www.100md.com
连作障碍(consecutive monoculture problem)是指在正常管理措施下，同一块地连续多年种植相同作物造成作物产量降低、品质变劣、生育状况变差、病虫害频发的现象[1]。丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根茎，药用历史悠久，具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功效[2]，属于常用大宗中药材之一。近年来，由于丹参药材市场需求量的逐年大幅度增加，目前主要依靠人工栽培来满足需要，山东、河南、陕西、四川等是其主要产区。在种植过程中，丹参连作现象比较严重。同一地块连续种植2年以上时，药材的产量与质量均有明显下降，生产中主要通过合理轮作来解决此问题，轮作作物主要有小麦、玉米、萝卜、菘蓝、黄芩等。研究发现[3-4]，丹参水提液对菘蓝和黄芩种子具有明显化感作用，但对萝卜种子有无化感作用及其发挥化感作用的物质基础尚未见报道。本研究以萝卜种子为受试体，初步探讨了丹参水浸液对其萌发和幼苗生长的化感效应，同时建立了丹参水浸液HPLC图谱，并采用灰关联度分析对化感效应与HPLC图谱间的谱效关系进行了研究，旨在为明确丹参化感物质及建立安全、有效、高产种植模式提供依据。
, 百拇医药
1 材料
丹参S.miltiorrhiza根及根茎于2013年10月采集于山东中医药大学药用植物园;萝卜Raphanus sativus L.种子购自长清黄河商场;迷迭香酸(20120809)、丹酚酸B(PA0418RA13)购自上海源叶生物科技有限公司。
AgiLent1260高效液相色谱仪(G1315B二极管阵列检测器)，ZORBAXSB-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)色谱柱，LRH-400-GⅡ型微电脑培养箱(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)等。
乙腈、甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 化感效应生物活性测定
2.1.1 发芽试验 参照文献[3]采用培养皿滤纸法进行发芽试验，9 d后统计发芽率、发芽势和发芽指数。种苗生长试验参照文献[3]采用砂培法进行，7 d后结束试验，每个处理随机选取50个幼苗，测定根长、苗地上部分、鲜重和干重，然后进行统计。
2.1.2 化感效应指标计算[4] 化感效应数据参照Williamson GB方法进行计算，即 RI=(Ti-TA)/TA×100%，其中Ti为测试项目的处理值，TA为对照值。RI≥0表示具有促进作用，RI<0表示具有抑制作用。RI绝对值越大，其化感作用潜力(促进或抑制作用)越大。, 百拇医药(牛敏 刘红燕 李佳 张永清)
[关键词] 丹参;水提液;指纹图谱;化感效应;谱效相关
Chromatography-efficacy relation study between HPLC fingerprints and
allelopathic effect of Salvia miltiorrhiza aqueous solution on radish
NIU Min， LIU Hong-yan， LI Jia， ZHANG Yong-qing
, 百拇医药
(Shandong University of Traditional Chinese Medicine， Ji′nan 250355， China)
[Abstract] To explore the effective components represented by fingerprint contributed to allelopathic effect of different Salvia miltiorrhiza aqueous concentration on seeds and seedlings of radish， grey relational analysis was used to establish the chromatography-efficacy relation. The results show that 15 peaks devote high allelopathic contribution to radish seeds and seedlings. The study will provide a new concept for allelochemicals screening and study.
, 百拇医药
[Key words] Salvia miltiorrhiza; aqueous extracts; HPLC; allelopathic; chromatography-efficacy relation
doi：10.4268/cjcmm20150519
[收稿日期] 2014-09-13
[基金项目] 山东省科技发展计划项目(2008GG2NS02022);山东中医药大学大学生研究训练计划(SRT)项目(201310441027)
[通信作者] 张永清，教授，主要从事中药资源及其质量控制研究，E-mail：zyq622003@126.com
[作者简介] 牛敏，硕士研究生，E-mail：962895949@qq.com
, http://www.100md.com
连作障碍(consecutive monoculture problem)是指在正常管理措施下，同一块地连续多年种植相同作物造成作物产量降低、品质变劣、生育状况变差、病虫害频发的现象[1]。丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根茎，药用历史悠久，具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功效[2]，属于常用大宗中药材之一。近年来，由于丹参药材市场需求量的逐年大幅度增加，目前主要依靠人工栽培来满足需要，山东、河南、陕西、四川等是其主要产区。在种植过程中，丹参连作现象比较严重。同一地块连续种植2年以上时，药材的产量与质量均有明显下降，生产中主要通过合理轮作来解决此问题，轮作作物主要有小麦、玉米、萝卜、菘蓝、黄芩等。研究发现[3-4]，丹参水提液对菘蓝和黄芩种子具有明显化感作用，但对萝卜种子有无化感作用及其发挥化感作用的物质基础尚未见报道。本研究以萝卜种子为受试体，初步探讨了丹参水浸液对其萌发和幼苗生长的化感效应，同时建立了丹参水浸液HPLC图谱，并采用灰关联度分析对化感效应与HPLC图谱间的谱效关系进行了研究，旨在为明确丹参化感物质及建立安全、有效、高产种植模式提供依据。
, 百拇医药
1 材料
丹参S.miltiorrhiza根及根茎于2013年10月采集于山东中医药大学药用植物园;萝卜Raphanus sativus L.种子购自长清黄河商场;迷迭香酸(20120809)、丹酚酸B(PA0418RA13)购自上海源叶生物科技有限公司。
AgiLent1260高效液相色谱仪(G1315B二极管阵列检测器)，ZORBAXSB-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)色谱柱，LRH-400-GⅡ型微电脑培养箱(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)等。
乙腈、甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 化感效应生物活性测定
2.1.1 发芽试验 参照文献[3]采用培养皿滤纸法进行发芽试验，9 d后统计发芽率、发芽势和发芽指数。种苗生长试验参照文献[3]采用砂培法进行，7 d后结束试验，每个处理随机选取50个幼苗，测定根长、苗地上部分、鲜重和干重，然后进行统计。
2.1.2 化感效应指标计算[4] 化感效应数据参照Williamson GB方法进行计算，即 RI=(Ti-TA)/TA×100%，其中Ti为测试项目的处理值，TA为对照值。RI≥0表示具有促进作用，RI<0表示具有抑制作用。RI绝对值越大，其化感作用潜力(促进或抑制作用)越大。, 百拇医药(牛敏 刘红燕 李佳 张永清)