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编号:12620562
间接竞争酶联免疫吸附法快速筛检莲子中黄曲霉毒素B1的污染水平(3)
http://www.100md.com 2015年2月15日 中国中药杂志 2015年第4期
     3.2.2标准曲线制备分别用样品稀释液和阴性提取液制备加标溶液,测定A。以AFB1浓度对数值为横坐标,相对吸光度(B/B0)为纵坐标建立基质未匹配与匹配后的标准曲线,见图1,B为加标孔的A,B0代表阴性孔(除AFB1外均加)的A。基质匹配后,AFB1在0.171~7.25 μg·L-1(IC15~IC80)线性关系良好(R2 >0.978),检测限LOD(IC10)可达0.128 μg·L-1,基质匹配标准曲线可用于检测莲子样品中的AFB1。半数抑制浓度(IC50)为1.29 μg·L-1,根据欧盟规定的AFB1最大残留限量标准5 μg·kg -1,分别在莲子样品前处理和ic-ELISA检测步骤中对其稀释5倍,得到微孔中AFB1最终浓度1μg·L-1,该浓度点分布在标准曲线半数抑制浓度附近,此时,样品中AFB1一旦超过限量标准,则能够灵敏的被ic-ELISA方法筛查出来。

    3.3交叉反应率的测定

    采用2.2项下建立的ic-ELISA方法测定AFB2, AFG1, AFG2,定量检测用的标准曲线和半数抑制浓度(IC50),按照公式CR(%)=[IC50(AFB1)/IC50(类似化合物)]×100计算AFB2 ......
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