益母草提取物对大鼠高尿酸血症的调控作用(1)
[摘要] 该研究采用灌胃给予SD大鼠氧嗪酸钾(300 mg·kg-1·d-1)制备高尿酸血症模型，并将其分为正常组、模型组、别嘌醇组、益母草提取物高、中、低剂量组(200，100，50 mg·kg-1·d-1)，给予氧嗪酸钾1 h后给药，连续给药7 d。分别测定血清尿酸(serum uric acid，SUA)，肌酐(serum creatinine，SCre)，尿中尿酸(uric acid，UA)及肾脏中相关转运体的表达水平，研究益母草提取物对高尿酸血症大鼠血尿酸、肾功能的影响及肾脏相关转运体的mRNA的调节作用。结果显示与模型组相比，益母草提取物可以显著性降低高尿酸血症大鼠血清尿酸，肌酐的水平，升高尿尿酸水平;同时，益母草提取物可以显著性下调肾脏尿酸盐转运体(urate transporter 1，URAT1)，葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9，GLUT9) mRNA 的表达，上调有机阳离子转运体(organic cation transportanter，OCT)，肉毒碱转运体(carnitine transporter，OCTN)mRNA的表达，具有促进肾脏尿酸排泄的作用。
, http://www.100md.com
[关键词] 益母草;高尿酸血症;肾脏转运体
[收稿日期] 2014-05-05
[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项(2011ZX09307-002-01)
[通信作者] 王涛，研究员，博士，Tel：(022)59596163，E-mail：wangtao@tjutcm.edu.cn
[作者简介] 闫曼，硕士研究生，E-mail：ymanhappyfly@126.com
随着人们生活水平的不断提高，饮食结构和生活习惯的改变，高尿酸血症的发病率呈逐年上升趋势，发病年龄逐渐低龄化[1]。同时，高尿酸血症与高血压、高血脂症、动脉粥样硬化、肥胖、糖尿病等疾病密切相关[2]，是一种严重的代谢性疾病，极大的影响了人类的生活质量。尿酸是人类嘌呤代谢的终末产物，当体内尿酸生成过多或排泄减少就会造成体内尿酸蓄积，形成高尿酸血症。同时，尿酸结晶在肾脏中沉积会造成肾损伤，在软组织中沉积则会引发痛风。益母草为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt新鲜或干燥地上部分，味辛、微苦，性微寒，入心包、肝、膀胱经，具有活血调经、利尿消肿、清热解毒的功效[3]。由于高尿酸血症的发病机制与肾脏尿酸代谢异常密切相关，考虑到益母草的利尿消肿作用，推断其可能具有改善高尿酸血症的作用。
, 百拇医药
1 材料
1.1 动物 SD大鼠48只，体重180～200 g，SPF级，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供。许可证号SCXK(京)2009-0004。大鼠在无特定病原体条件下饲养，每笼4只，温度(22±2) ℃，湿度50%～60%，12 h交替照明，光照时间早8：30至晚8：30，自由摄食饮水。适应性喂养1周后用于实验。
1.2 药物及试剂 益母草购于河北省安国药材市场，由天津中医药大学中药标准馆李天祥副教授鉴定为益母草L. japonicus。取益母草干燥全草用10倍量的50%EtOH溶液依次加热回流提取3，1，1 h，合并滤液，减压回收溶剂，将取得浸膏真空干燥即得。氧嗪酸钾(美国Sigma公司，批号STBC6418V);别嘌醇(重庆科瑞制药(集团)有限公司，批号522001);尿酸、肌酐测定试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司);引物合成(北京鼎国昌盛有限责任公司);SYBR Green PCR Master Mix 试剂盒、High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit 试剂盒(美国Applied Biosystems公司)。
, http://www.100md.com
1.3 仪器 PE酶标仪、PE-480基因扩增仪(美国PerkinElmer公司);低温高速离心机(美国Thermo公司);7500 Real-Time PCR system 实时荧光定量PCR仪(美国Applied Biosystems公司);FA1004N电子天平(上海民桥精密科学仪器有限公司)。
2 方法
2.1 药物的配置 氧嗪酸钾用5%阿拉伯胶溶液配制成60 g·L-1药液，给药量为300 mg·kg-1，给药体积5 mL·kg-1;益母草提取物用纯水配制成40，20，10 g·L-1药液，给药量为200，100，50 mg·kg-1，给药体积为5 mL·kg-1;别嘌醇用纯水溶解成1 g·L-1混悬液，给药量为5 mg·kg-1，给药体积为5 mL·kg-1。
2.2 动物分组及给药 SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、别嘌醇组、益母草提取物高、中、低剂量组(200，100，50 mg·kg-1)，每组8只。除正常组外，灌胃给予氧嗪酸钾(300 mg·kg-1)进行造模，空白组给予相应体积5%阿拉伯胶溶液，1 h后，灌胃给予相应药物，空白和模型组给予同体积生理盐水。, 百拇医药(闫曼 安雅婷 李舰 吴智珍 王涛)
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[关键词] 益母草;高尿酸血症;肾脏转运体
[收稿日期] 2014-05-05
[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项(2011ZX09307-002-01)
[通信作者] 王涛，研究员，博士，Tel：(022)59596163，E-mail：wangtao@tjutcm.edu.cn
[作者简介] 闫曼，硕士研究生，E-mail：ymanhappyfly@126.com
随着人们生活水平的不断提高，饮食结构和生活习惯的改变，高尿酸血症的发病率呈逐年上升趋势，发病年龄逐渐低龄化[1]。同时，高尿酸血症与高血压、高血脂症、动脉粥样硬化、肥胖、糖尿病等疾病密切相关[2]，是一种严重的代谢性疾病，极大的影响了人类的生活质量。尿酸是人类嘌呤代谢的终末产物，当体内尿酸生成过多或排泄减少就会造成体内尿酸蓄积，形成高尿酸血症。同时，尿酸结晶在肾脏中沉积会造成肾损伤，在软组织中沉积则会引发痛风。益母草为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt新鲜或干燥地上部分，味辛、微苦，性微寒，入心包、肝、膀胱经，具有活血调经、利尿消肿、清热解毒的功效[3]。由于高尿酸血症的发病机制与肾脏尿酸代谢异常密切相关，考虑到益母草的利尿消肿作用，推断其可能具有改善高尿酸血症的作用。
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1 材料
1.1 动物 SD大鼠48只，体重180～200 g，SPF级，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供。许可证号SCXK(京)2009-0004。大鼠在无特定病原体条件下饲养，每笼4只，温度(22±2) ℃，湿度50%～60%，12 h交替照明，光照时间早8：30至晚8：30，自由摄食饮水。适应性喂养1周后用于实验。
1.2 药物及试剂 益母草购于河北省安国药材市场，由天津中医药大学中药标准馆李天祥副教授鉴定为益母草L. japonicus。取益母草干燥全草用10倍量的50%EtOH溶液依次加热回流提取3，1，1 h，合并滤液，减压回收溶剂，将取得浸膏真空干燥即得。氧嗪酸钾(美国Sigma公司，批号STBC6418V);别嘌醇(重庆科瑞制药(集团)有限公司，批号522001);尿酸、肌酐测定试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司);引物合成(北京鼎国昌盛有限责任公司);SYBR Green PCR Master Mix 试剂盒、High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit 试剂盒(美国Applied Biosystems公司)。
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1.3 仪器 PE酶标仪、PE-480基因扩增仪(美国PerkinElmer公司);低温高速离心机(美国Thermo公司);7500 Real-Time PCR system 实时荧光定量PCR仪(美国Applied Biosystems公司);FA1004N电子天平(上海民桥精密科学仪器有限公司)。
2 方法
2.1 药物的配置 氧嗪酸钾用5%阿拉伯胶溶液配制成60 g·L-1药液，给药量为300 mg·kg-1，给药体积5 mL·kg-1;益母草提取物用纯水配制成40，20，10 g·L-1药液，给药量为200，100，50 mg·kg-1，给药体积为5 mL·kg-1;别嘌醇用纯水溶解成1 g·L-1混悬液，给药量为5 mg·kg-1，给药体积为5 mL·kg-1。
2.2 动物分组及给药 SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、别嘌醇组、益母草提取物高、中、低剂量组(200，100，50 mg·kg-1)，每组8只。除正常组外，灌胃给予氧嗪酸钾(300 mg·kg-1)进行造模，空白组给予相应体积5%阿拉伯胶溶液，1 h后，灌胃给予相应药物，空白和模型组给予同体积生理盐水。, 百拇医药(闫曼 安雅婷 李舰 吴智珍 王涛)