近红外光谱技术用于热毒宁注射液金银花青蒿醇沉过程在线监测研究(1)
[摘要] 近红外光谱技术作为一种快速的过程分析技术已被成功的应用于中药制药领域。该文以热毒宁注射液金银花青蒿醇沉过程为例，采用近红外光谱技术建立热毒宁注射液金银花青蒿醇沉过程关键指标的定量分析模型，具体方法如下：在线采集金银花青蒿醇沉过程142个样品近红外光谱图，完成样品主要药效指标的离线检测，经过异常点的剔除、光谱预处理方法的确定和最佳波段的选择，运用偏最小二乘法(PLS)建立近红外光谱与主要药效指标之间的定量校正模型，并对金银花青蒿醇沉过程的未知样品进行预测，达到快速检测的目的。试验结果显示所建立的新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、断氧化马钱子苷4个药效指标的定量校正模型相关系数(R2)分别为0.973 872，0.985 449，0.975 509，0.979 790;未知样品预测值与检测值的相对偏差(RSEP)分别为2.922 49%，2.341 37%，2.930 40%，2.184 60%，预测效果理想。该研究得出采用近红外光谱技术建立的定量校正模型表现出较好的稳定性和预测精度，可用于热毒宁注射液金银花青蒿醇沉过程样品的主要药效指标的快速定量检测，达到醇沉过程在线监测的目的。
, 百拇医药
[关键词] 近红外光谱;偏最小二乘法;热毒宁注射液;醇沉过程;药效指标
[收稿日期] 2014-09-16
[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项(2013ZX09402203)
[通信作者] *萧伟，研究员级高级工程师，主要从事中药新药研究及中药制药新技术研究，Tel： (0518)81152325，E-mail： wzhzh-nj@163.com
[作者简介] 王永香，E-mail：xiaoyu99201@163.com
中药注射剂是传统中医药理论与现代制药技术相结合的产物，该剂型突破了传统中药的给药方式，具有生物利用度高、疗效确切、作用迅速的特点，尤其在抢救神志昏迷、不能口服给药的重症病人等方面，具有无可比拟的优势。然而自2005年6月葛根素注射剂的新发不良反应病例报告，到2006年6月鱼腥草事件、2008年10月刺五加事件、茵栀黄事件及2009年2月双黄连事件等，中药注射液不良反应的频发引起了业界和舆论对中药注射剂安全性的高度重视，严重的影响了中药注射剂行业的进一步发展。查阅近年来与中药注射剂不良反应相关的文献资料，总结出引起中药注射剂不良反应的原因很多，其中产品自身的原因主要是生产过程缺少行之有效的控制方法，监控不到位，无法保证批次间的质量一致性，因此生产过程在线控制方法的建立势在必行。
, 百拇医药
近红外光谱技术作为一种过程分析技术近年来发展迅速，其独特的优势在于可以快速得到准确度很高的指标定量结果、且分析速度快，不破坏样品，不污染环境[1]。近年来近红外光谱技术广泛应用于中药制药过程控制研究，包括中药材的鉴定、药效成分含量测定和生产过程的在线检测和监控[2-4]。
热毒宁注射液处方由青蒿、金银花、栀子3味药材组成，文献查询[5-9]显示青蒿金银花2味药材中起到解热、抗病毒、抗炎等作用的指标成分主要有香豆素类、有机酸类、黄酮类成分，该品种药效物质基础研究结果显示有机酸类的绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸，黄酮类的木犀草苷及断氧化马钱子苷均具有较好的抗病毒作用及调解免疫的作用。本研究以热毒宁注射液金银花青蒿醇沉过程为研究对象，采用近红外光谱分析技术，结合偏最小二乘化学计量学方法，建立金银花青蒿醇沉过程新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、断氧化马钱子苷4个关键药效指标的定量校正模型，并使用所建立的模型对未知样品进行预测，结果显示预测值与检测值的相对偏差均小于5%。本研究建立了一种醇沉过程关键质量指标的快速、准确、高效的一种检测方法，为实现醇沉过程在线监控提供了依据。
, 百拇医药
1 材料
AOTF-NIR光谱仪(BRIMROSE USA)，配套使用SNAP光谱采集原件和CAMO化学计量学软件：Unscrambles;U3000 型高效液相色谱仪，Ultimate Mate 3000 型检测器(美国 Cohesive Technologies 公司)，ME104E型电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司);甲醇(批号021240102，上海星可高纯溶剂有限公司);磷酸(批号20120703，国药集团化学试剂有限公司);绿原酸(批号110753-201314，中国食品药品检定研究院);隐绿原酸(批号101245643，Sigma公司)，新绿原酸(批号101212168，Sigma公司);断氧化马钱子苷(批号20120625，上海永恒生物科技有限公司)。
热毒宁注射液金银花青蒿醇沉过程建模样品来自江苏康缘药业股份有限公司前处理提取精制车间。醇沉近红外在线采集示意图见图1，由于醇沉过程药液体系为非均匀体系，为了保证近红外光谱采集时样本的均匀性，不仅在醇沉罐体中取样口位置按装了过滤装置(40目)，还在外循环管道上安装桶式过滤器(80目)，确保样本均匀性。图中绿色框为近红外光谱采集及取样循环管路。根据预实验结果，金银花青蒿醇沉过程取样方式确定为醇沉开始15 min后每隔10 min对样品进行近红外光谱采集，并同时取出100 mL样品，至加醇结束。加醇结束后静置前6 h每隔2 h取样1次，静置后期30 h每6 h取样1次，本次试验共取样12个批次，其中11个批次共142个样品组成校正集用于建立近红外光谱与质量指标之间的定量校正模型，1个批次的11个样本作为未知样品集用于验证模型的预测性能。
2 方法与结果
2.1 近红外光谱采集
近红外光谱采集有关参数设置：光谱范围1 100～2 300 nm，分辨率2 nm，光程2 mm，扫描平均次数300;检测方法为透射，每个样品采集3张光谱，取平均光谱值作为样品的近红外的近红外光谱图。
2.2 药效成分选择含量测定, 百拇医药(王永香 米慧娟 张传力 苏光 毕宇安 王振中 萧伟)
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[关键词] 近红外光谱;偏最小二乘法;热毒宁注射液;醇沉过程;药效指标
[收稿日期] 2014-09-16
[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项(2013ZX09402203)
[通信作者] *萧伟，研究员级高级工程师，主要从事中药新药研究及中药制药新技术研究，Tel： (0518)81152325，E-mail： wzhzh-nj@163.com
[作者简介] 王永香，E-mail：xiaoyu99201@163.com
中药注射剂是传统中医药理论与现代制药技术相结合的产物，该剂型突破了传统中药的给药方式，具有生物利用度高、疗效确切、作用迅速的特点，尤其在抢救神志昏迷、不能口服给药的重症病人等方面，具有无可比拟的优势。然而自2005年6月葛根素注射剂的新发不良反应病例报告，到2006年6月鱼腥草事件、2008年10月刺五加事件、茵栀黄事件及2009年2月双黄连事件等，中药注射液不良反应的频发引起了业界和舆论对中药注射剂安全性的高度重视，严重的影响了中药注射剂行业的进一步发展。查阅近年来与中药注射剂不良反应相关的文献资料，总结出引起中药注射剂不良反应的原因很多，其中产品自身的原因主要是生产过程缺少行之有效的控制方法，监控不到位，无法保证批次间的质量一致性，因此生产过程在线控制方法的建立势在必行。
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近红外光谱技术作为一种过程分析技术近年来发展迅速，其独特的优势在于可以快速得到准确度很高的指标定量结果、且分析速度快，不破坏样品，不污染环境[1]。近年来近红外光谱技术广泛应用于中药制药过程控制研究，包括中药材的鉴定、药效成分含量测定和生产过程的在线检测和监控[2-4]。
热毒宁注射液处方由青蒿、金银花、栀子3味药材组成，文献查询[5-9]显示青蒿金银花2味药材中起到解热、抗病毒、抗炎等作用的指标成分主要有香豆素类、有机酸类、黄酮类成分，该品种药效物质基础研究结果显示有机酸类的绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸，黄酮类的木犀草苷及断氧化马钱子苷均具有较好的抗病毒作用及调解免疫的作用。本研究以热毒宁注射液金银花青蒿醇沉过程为研究对象，采用近红外光谱分析技术，结合偏最小二乘化学计量学方法，建立金银花青蒿醇沉过程新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、断氧化马钱子苷4个关键药效指标的定量校正模型，并使用所建立的模型对未知样品进行预测，结果显示预测值与检测值的相对偏差均小于5%。本研究建立了一种醇沉过程关键质量指标的快速、准确、高效的一种检测方法，为实现醇沉过程在线监控提供了依据。
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1 材料
AOTF-NIR光谱仪(BRIMROSE USA)，配套使用SNAP光谱采集原件和CAMO化学计量学软件：Unscrambles;U3000 型高效液相色谱仪，Ultimate Mate 3000 型检测器(美国 Cohesive Technologies 公司)，ME104E型电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司);甲醇(批号021240102，上海星可高纯溶剂有限公司);磷酸(批号20120703，国药集团化学试剂有限公司);绿原酸(批号110753-201314，中国食品药品检定研究院);隐绿原酸(批号101245643，Sigma公司)，新绿原酸(批号101212168，Sigma公司);断氧化马钱子苷(批号20120625，上海永恒生物科技有限公司)。
热毒宁注射液金银花青蒿醇沉过程建模样品来自江苏康缘药业股份有限公司前处理提取精制车间。醇沉近红外在线采集示意图见图1，由于醇沉过程药液体系为非均匀体系，为了保证近红外光谱采集时样本的均匀性，不仅在醇沉罐体中取样口位置按装了过滤装置(40目)，还在外循环管道上安装桶式过滤器(80目)，确保样本均匀性。图中绿色框为近红外光谱采集及取样循环管路。根据预实验结果，金银花青蒿醇沉过程取样方式确定为醇沉开始15 min后每隔10 min对样品进行近红外光谱采集，并同时取出100 mL样品，至加醇结束。加醇结束后静置前6 h每隔2 h取样1次，静置后期30 h每6 h取样1次，本次试验共取样12个批次，其中11个批次共142个样品组成校正集用于建立近红外光谱与质量指标之间的定量校正模型，1个批次的11个样本作为未知样品集用于验证模型的预测性能。
2 方法与结果
2.1 近红外光谱采集
近红外光谱采集有关参数设置：光谱范围1 100～2 300 nm，分辨率2 nm，光程2 mm，扫描平均次数300;检测方法为透射，每个样品采集3张光谱，取平均光谱值作为样品的近红外的近红外光谱图。
2.2 药效成分选择含量测定, 百拇医药(王永香 米慧娟 张传力 苏光 毕宇安 王振中 萧伟)