当前位置: 首页 > 期刊 > 《中国中药杂志》 > 2014年第22期
编号:12635500
人参皂苷Rg1延缓脑衰老机制研究(2)
http://www.100md.com 2014年11月15日 中国中药杂志 2014年第22期
     1.7酶标比色法检测海马区SOD,GSH活性SOD活性:在96孔板中分别加入正常组(A)、Rg1正常组(B)、脑衰老模型组(C)、Rg1脑衰老模型组(D) 蛋白样品5 g·L-1,每组设置2个复孔。按试剂说明书操作并按要求设置空白对照孔。待测样品中SOD酶活力单位=(A空白对照1-A样品)/(A样品-A空白对照2)。

    GSH含量:每10 μg海马组织加入100 μL蛋白去除试剂S溶液充分匀浆,冰上静置10 min;4 ℃,1万×g,离心10 min;取上清按试剂说明书进行加样测定并计算GSH含量。

    1.8Southern blotting检测端粒长度取新鲜分离的脑海马组织0.5 g,PBS洗涤3次,匀浆器匀浆,提取DNA,37 ℃,Hinf/RsaI酶消化2 h。在5 V·cm-1电压下,1%琼脂糖凝胶电泳分离DNA。凝胶经变性、中和后,用20×SSC作转移液,虹吸法转移DNA至尼龙膜。用10 mL预杂交液,42 ℃预杂交1 h,加入端粒探针(100 μg·L-1),42 ℃杂交过夜。取膜,用2×SSC的0.1%SDS液洗膜30 min,封闭液封闭15 min。Strptavdin-HRP(1∶400)缓冲液 ......
上一页1 2 3下一页

您现在查看是摘要页,全文长 4608 字符