2.2.2 组织匀浆 取出-70 ℃冻存的肺组织，按50 mg组织加入1 mL TRIzol试剂进行匀浆。组织匀浆后，通过2～8 ℃下12 000×g离心10 min，去除一些不溶性物质，沉淀中包括细胞膜、多聚糖和高相对分子质量的DNA，上清部分含RNA。将上清匀浆液移入无RNA酶的离心管中。30 ℃孵育已匀浆的样品5～15 min，使核酸与蛋白质完全分离，每管中加入0.2 mL的氯仿。安全地盖好样品管的盖子，用力摇动离心管15 s，并在30 ℃放置2～3 min，2～8 ℃下12 000×g离心15 min。取无色透明的上层水相移入新的离心管中，加入0.5 mL的异丙醇30 ℃孵育10 min，形成RNA沉淀，2～8 ℃下12 000×g离心10 min，将沉淀聚集到管底。去除上清，用1 mL 75%乙醇洗RNA沉淀物。干燥RNA沉淀用无RNA酶水溶解(40 μL/50 mg组织)，-70 ℃冻存备用。

    其他细胞因子的RNA提取同TNF-α。

    2.3 RT-PCR

    以TNF-α的RNA扩增为例 ......