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编号:13144747
+损伤的SH—SY5Y细胞中的影响及葛根素的干预作用> 伴侣自吞噬在MPP+损伤的SH—SY(2)
http://www.100md.com 2014年1月1日 《中国中药杂志》 2014年第1期
+损伤的SH—SY5Y细胞中的影响及葛根素的干预作用'> 伴侣自吞噬在MPP+损伤的SH—SY5Y细胞中的影响及葛根素的干预作用
     2 方法

    2.1 细胞培养 SH-SY5Y细胞经常规传代培养,培养液为含10% 胎牛血清的DMEM培养液,置于37 ℃,5% CO2培养箱中培养,每3~4 d传代1次,选取对数生长期细胞进行实验。

    2.2 CCK-8法检测细胞存活率 取对数增殖期SH-SY5Y细胞,消化收集并调整成密度为4×104个/mL的细胞悬液,接种于96孔板,每孔100 μL,培养过夜待细胞贴壁良好后进行处理。给药组加不同浓度的葛根素溶液,终浓度依次为50.0,25.0,12.5 μmol·L-1,预保护30 min后,加MPP+药液,终浓度为1 mmol·L-1,并设空白对照组。每组8个复孔。37 ℃,5%CO2培养箱中培养24 h。结束培养前3 h每孔加入CCK-8 20 μL,培养箱中继续培养3 h,振荡20 min,混匀。Spectramax M2e多功能酶标仪检测波长450 nm的每孔吸光度A ......
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