1.7 RT-PCR法检测软骨细胞周期调控因子mRNA表达 空白组、独活寄生汤水提物低、中、高剂量组(100，200，400 mg·L^-1)干预软骨细胞24 h后，TRIZOL法提取细胞总RNA，核酸蛋白检测仪分析RNA纯度，取2 μg逆转录成cDNA，以cDNA作为模板行PCR扩增Cyclin D1，CDK4，CDK6，P21及β-actin，引物序列及退火温度见表1。扩增产物经1.5%琼脂糖电泳后，用凝胶成像系统分析电泳结果。

    1.8 统计学处理 应用PASW Statistics 18.0软件进行数据统计处理，计量资料以±s表示，采用单因素方差分析比较各个实验组之间的差异显著性，P<0.05为差异具有统计学意义。

    表1 RT-PCR引物序列、扩增片段长度及退火温度

    Table 1 Primer sequences，amplified fragment length and annealing temperature for RT-PCR

    2 结果

    2.1 软骨细胞形态结构观察 软骨细胞接种24 h后贴壁生长 ......