对215个半夏叶柄进行外源sHSP基因的转化，共得到39株抗性植株。对抗性植株进行gus组织化学染色，仅有6株染色呈阳性。然后对这6株抗性半夏进行PCR检测，全部可以扩增出875 bp的特异性片段(图4)，转化率为2.79%。

    4 讨论

    农杆菌介导的植物外源基因遗传转化受一系列因素的影响，菌液浓度和侵染时间是影响转化效率的重要因素[8]。较低的菌液浓度不利于农杆菌附在外植体上，T-DNA不能有效整合进植物细胞基组组，大大降低转化效果；菌液浓度过高或侵染时间过长，使外植体受到农杆菌过度伤害而导致外植体切口褐化、腐烂严重，且不利于共培养后去除农杆菌，从而大大降低转化效率[9]。因而，在菌液浓度、侵染时间上需严格控制，以避免或减轻对外植体的伤害及农杆菌的污染程度。本试验选择菌液浓度A为0.5，侵染时间为15 min作为适宜的转化条件。同时，加入一定浓度的外源酚类化合物如AS，能够有效的诱导vir基因活化，激活毒性区上其他基因的表达，进一步促进T-DNA的转移，提高转化频率[6]。

    卡那霉素能干扰植物细胞叶绿体及线粒体的蛋白质合成，引起植物绿色器官的黄化，最终导致植物细胞的死亡[10] ......