四氯化碳药物性肝损伤体外模型的改进(3)
鉴于改良损伤模型具有以上特点，作者建议使用该损伤方法时注意以下事宜：进行具体实验时，最好先以较小的区间设置损伤浓度梯度，摸索出最适损伤浓度和损伤时间；将过量的CCl4加入培养液中提前配制饱和损伤液，并置于37 ℃环境，使CCl4有充分的时间达到饱和，但时间不宜过长，以免培养液变性；用容器充分混匀所需损伤浓度损伤液后再加损伤，尽量别在有细胞的培养瓶或培养孔中混合损伤液，以免混合不均匀，加损伤液方法与换液方法相同，即先吸弃培养瓶或培养孔中原培养液，再换入等体积合适浓度的损伤液；操作过程中，不宜长时间将损伤液置于低温环境，以免CCl4析出。总之，利用最适损伤浓度的CCl4损伤液与肝细胞共培养最适损伤时间，可建立较理想的药物性肝损伤体外模型。需特别注意的是，对于不同的培养液类型、细胞株、细胞接种密度以及不同的实验需要，这个最适浓度和最适时间是不同的，考虑到要为保肝药物作用的发挥提供一个适当的空间和时间 ......
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