参附益心方对缺氧原代心肌细胞脂肪酸利用的影响(2)
1.3 动物SPF级SD大鼠,新生1~3 d,雌雄不限,体质量约5~6 g,由河南省动物实验中心提供,动物生产许可证号:SCXK(豫)2015-0005。
2 方法
2.1 药液制备
2.1.1参附益心方药液参考本课题组已发表文献[6],称取参附益心方浸膏干粉0.25 g,用DMEM高糖培养基10 mL稀释,经0.2 μm滤膜滤过后,制得质量浓度为25mg/mL(以浸膏干粉质量计)的药液。需现用现配。2.1.2辅酶Q.。药液称取辅酶Q10片50 mg,用DMEM高糖培养基5.8 mL稀释,經0.2 μm滤膜滤过后,制得浓度为1X10-2 mol/L的药液,备用。
2.2 原代心肌细胞分离、培养与鉴定
于无菌条件下取出乳鼠的心尖部,以4℃的PBS清洗3次,随后将其剪成约1 mm3大小的组织块,经含0.08%胰蛋白酶的心肌细胞消化液吹打混匀后,转移至玻璃瓶内,于37℃水浴中孵育6 min,自然沉淀 ......
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