2.5 凋亡相关蛋白表达情况检测

    采用免疫组化法检测比格犬肝组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3、p53蛋白的表达情况。取“2.3”项下肝组织石蜡切片，脱蜡后置于水中，以EDTA抗原修复液进行修复，随后加入3%H2O2以灭活内源性过氧化物酶，用10%山羊血清封闭30 min，分别滴加Bcl-2、Bax、Caspase-3、p53多克隆抗体(稀释度均为1 ∶ 50)，4 ℃孵育过夜；滴加HRP标记二抗(1 ∶ 1)，常温孵育50 min；以DAB显色，Harris苏木精染色液轻度复染，脱水、透明、封片，置于显微镜下观察(p53阳性细胞的细胞核呈棕黄色，其余蛋白阳性细胞的胞质内可见棕黄色颗粒)。每只犬每张切片随机挑选6个视野拍照，采用ImagePro Plus 6.0软件对染色阳性区域进行分析，计算阳性细胞的累积光密度值(IOD)以表示凋亡相关蛋白的表达水平。

    2.6 统计学方法

    采用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析。采用Shapiro-Wilk法进行正态性检验，采用Levene检验进行方差齐性检验。符合正态分布且方差齐的计量资料以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA)。P<0.05为差异有统计学意义。

    3 结果

    3.1 肝细胞凋亡检测结果

    正常对照组比格犬肝组织中偶见凋亡细胞；停止照射后 ......