7. RTCA

    细胞用0.25%的胰酶消化后重悬，细胞计数后取一部分细胞稀释至1×104/ml，充分混匀后取200 μl细胞悬液加入到RTCA仪配套的细胞培养板中，按程序设置实验名称、细胞类型、初始数量、扫描方式和频率，启动实验程序直至实验结束，实验重复3次，并对实验结果进行比对和分析。

    三、统计学处理

    用SPSS 21.0对实验数据进行统计学分析。组间比较采用独立样本t检验，P < 0.05为差异有统计学意义。

    结 果

    一、重组真核表达载体pEBFP-PXN构建成功

    以Hep G2细胞mRNA为模板经逆转录获得cDNA，经PCR反应获得PXN基因蛋白编码区，经Xho Ⅰ和 EcoR Ⅰ双酶切后插入真核表达载体pEBFP-C1中，构建PXN基因真核表达载体pEBFP-PXN(图1A)。对pEBFP-PXN用Xho Ⅰ和 EcoR Ⅰ双酶切进行鉴定(图1B)，并对其进行DNA正反测序，结果证明PXN基因无点突变，正是所需重组质粒 ......