CCR5第一和第二胞外环特异性结合短肽对大鼠结肠炎的炎症细胞

CCR5第一和第二胞外环特异性结合短肽对大鼠结肠炎的炎症细胞浸润及NFκB/TNFα信号通路的影响(2)

http://www.100md.com 2018年5月1日《新医学》 20185

     材料与方法

    一、实验动物

    健康成年雌性SpragueDawley(SD)大鼠40只，重量(200±20)g，购自中山大学实验动物中心，动物实验伦理批准编号为IACUCDB160313，饲养条件为SPF级。

    二、主要试剂与仪器

    5%TNBS购自Sigma公司；Trizol RNA提取试剂盒、Premix Taq PCR试剂盒及Realtime PCR试剂盒购自Takara公司；NFκB通路抗体试剂盒[包括兔抗鼠IKKβ， PhosphoIKK α/β(Ser176/180)， p65， Phosphop65(Ser536)， IκBα以及PhosphoIκBα(Ser32)抗体]购自Cell Signaling Technology公司；兔抗鼠TNFα，βactin抗体购自Novus公司；CCR5第一、第二胞外环的两条活性模拟短肽由上海吉尔生化有限公司合成，纯度为95%，其序列分别为GHWKVWL(简称GH)，HYIDFRW(简称HY)。实时荧光定量PCR仪(Light Cycler96) ......

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